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浅谈拮抗草莓尖孢镰刀菌根腐病生防细菌的分离鉴定及抑菌作用的初步毕业论文翻译

摘要:采取五点对峙法,以分离自土壤的436株细菌菌株中筛选对草莓根腐病菌——尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),具有拮抗作用的细菌,筛选得到了3株稳定性好,具有较高拮抗活性的菌株w-25、w-79和w-181。拮抗菌w-25对尖孢镰刀菌的抑菌带达到11.0mm,w-79和w-181的抑菌带分别达到5.4mm和6.4mm。此外,这3株拮抗菌对草莓灰霉病菌(Botrytis Cinerea)、草莓红中柱致病菌(Fragria ananassa)和草莓胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)等草莓致病真菌具有很强的拮抗作用,有一定的广谱抑菌活性。此外,本试验筛选到的3株拮抗菌不仅在平板对峙实验中抑菌效果显著,而且在盆栽试验中也有较好的防治效果。这3株菌株经过形态观察、理化浅析和分子鉴定,认为w-25为荧光假单孢菌(Pseudomonas fluorescens), w-181和w-79为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtips)。对w-25菌株拮抗物质基本特性浅析,结果表明w-25菌株在25.40℃下处理30min,能保持较好的抗菌活性,而60-120℃下,拮抗菌抗菌活性较低。在pH为4-8介质处理12h后,抑菌活性保持在80%以上,但是在9-10碱性介质中,抑菌活性有所下降。蛋白酶敏感实验中,w-25菌株拮抗活性物质对胰蛋白酶和胃蛋白酶不敏感,而对蛋白酶K敏感。对w-25菌株拮抗活性物质进行了初步检测,结果表明在嗜铁素检测实验中,w-25拮抗菌能产生嗜铁素。用特异性引物PHL2a/2b进行w-25菌株2,4-DAPG(抗生素2,4-二乙酰基间苯二酚)基因PCR检测,经测序验证w-25菌株有着2,4-DAPG。而几丁质酶实验中,则发现拮抗菌株w-25不能产生几丁质酶。显微观察发现拮抗菌代谢产物会破坏致病菌尖孢镰刀菌菌丝形态,电镜观察发现致病菌细胞器溶解,细胞内液泡变大 关键词:草莓根腐病菌论文 拮抗作用论文 细菌论文 活性物质论文
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    摘要3-4

    Abstract4-7

    第一章 引言7-15

    1 草莓根腐病探讨近况7-9

    1.1 草莓根腐病的致病菌7-8

    1.2 尖孢镰刀菌的分类地位8

    1.3 尖孢镰刀菌的生物学特性8

    1.4 尖孢镰刀菌的致病机理8

    1.5 草莓根腐病的危害特点8-9

    2 草莓根腐病的防治9-11

    2.1 化学防治9

    2.2 农业防治9-10

    2.3 生物防治10-11

    3 生物防治的机制11-13

    3.1 产生细胞壁降解酶11-12

    3.2 抗生作用12

    3.3 竞争作用12

    3.4 诱导系统抗性12-13

    3.5 溶菌作用和促生作用13

    4 有着的不足及展望13

    5 本探讨的目的与作用13-15

    第二章 草莓根腐病菌拮抗细菌的分离与筛选15-19

    1 材料15

    1.1 供试靶标真菌15

    1.2 所用仪器15

    1.3 培养基15

    2 策略15-16

    2.1 土壤细菌的分离纯化15

    2.2 拮抗细菌的筛选15-16

    2.3 拮抗菌株抑真菌活性测定16

    2.4 盆栽防治试验16

    3 结果与浅析16-18

    3.1 拮抗细菌菌株的筛选及拮抗效果16-17

    3.2 拮抗菌菌株对8种病原真菌的抑制作用17

    3.3 拮抗菌对草莓根腐病盆栽试验防治效果17-18

    4 小结与讨论18-19

    第三章 草莓根腐病菌拮抗细菌的鉴定19-29

    1 材料19-22

    1.2 常用培养基19

    1.3 染色试剂19-20

    1.4 生理生化检测培养基及试剂20-22

    1.5 分子生物学试剂22

    2 策略22-26

    2.1 拮抗菌形态观察及生理生化鉴定22-26

    2.2 拮抗细菌16S RRNA基因的PCR扩增、序列测定与浅析26

    3 结果与浅析26-28

    3.1 拮抗菌株的形态26

    3.2 拮抗菌的生理生化鉴定26-27

    3.3 16SRRNA基因序列浅析27-28

    4 小结与讨论28-29

    第四章 生防细菌W-25拮抗机理的初步探讨29-37

    1 材料29

    1.1 试验材料29

    1.2 试验仪器29

    2 策略29-32

    2.1 拮抗细菌代谢产物的抑菌活性测定29-30

    2.2 抑菌活性物质基本特性浅析30

    2.3 抑菌活性物质的探讨30-31

    2.4 抑菌活性物质对草莓根腐病菌细胞形态的影响31-32

    3 结果32-35

    3.1 拮抗细菌代谢产物的抑菌活性32

    3.2 抑菌活性物质基本特性浅析32-33

    3.3 抑菌活

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