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简谈肾脏PPARγ/RARs信号通路在单侧输尿管梗阻大鼠中与肾间质纤维化联系的硕士论文开题报告
l-Ⅳ)的蛋白表达。结果(1)与假手术组对比,模型组大鼠:①肾脏病理显著转变:大量的淋巴细胞、单核细胞浸润,萎缩的肾小管上皮细胞及肾小管基底膜破坏,形成胶原纤维化,RIF指数明显增高(P0.01),第4周末较第2周末肾脏RIF指数明显增高;②肾脏组织RAR αRARβ的mRNA极为蛋白表达均明显降低(P0.01),第4周末较第2周末表达降低更为明显
摘要:第一部分RARs在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中的表达和作用目的研究维甲酸受体(retinoic acid receptors, RARs)在单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)大鼠肾脏组织中的表达与作用。办法6周龄雄性Wistar大鼠80只随机分为模型组和假手术组,每组40只,所有大鼠行麻醉后左背侧切口术,其中模型组大鼠的手术为分离左输尿管后行双重结扎,而假手术组大鼠的手术只探查到肾包膜。于造模后的第2周末与4周末分别处死20只大鼠,切片行Masson和HE染色检测肾脏病理学变化,计算肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis, RIF)指数;运用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应法(reverse transcription reaction, RT-PCR)、免疫组织化学和免疫蛋白印迹技术(Western blot)检测大鼠肾脏组织维甲酸受体a (retinoic acid receptor α, RARα)、维甲酸受体p(retinoic acid receptor β, RARβ)、维甲酸受体γ (retinoic acid receptor γ, RARy)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)的mRNA和蛋白表达;运用免疫组织化学、western-blot法检测肾脏组织纤维连接蛋白(fibronectin, FN)与Ⅳ型胶原(collagen-Ⅳ, Col-Ⅳ)的蛋白表达。结果(1)与假手术组对比,模型组大鼠:①肾脏病理显著转变:大量的淋巴细胞、单核细胞浸润,萎缩的肾小管上皮细胞及肾小管基底膜破坏,形成胶原纤维化,RIF指数明显增高(P0.01),第4周末较第2周末肾脏RIF指数明显增高;②肾脏组织RAR αRARβ的mRNA极为蛋白表达均明显降低(P0.01),第4周末较第2周末表达降低更为明显;两组大鼠肾脏组织RARγ的mRNA极为蛋白表达均无明显差别(P0.05);③肾脏组织TGF-β1的mRNA极为蛋白表达均明显增多(P0.01),第4周末较第2周末表达增高更为明显;④肾脏组织Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均明显增高(P0.01),第4周末较第2周末表达增高更为明显。(2)相关性分析:大鼠肾脏组织RARα的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、 Col-Ⅳ、FN蛋白表达均呈明显负相关(r=-0.833、-0.763、-0.825、-0.918;均P0.01);肾脏组织RARβ的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ. FN蛋白表达均呈明显负相关(r=-0.728、-0.736、-0.818、-0.784;均P0.01);肾脏组织TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达与RIF指数均呈明显正相关(r=0.995、0.977、0.969;均P0.01);而肾脏组织RARγ的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达无明显相关(r==0.145、0.261、0.126、0.225;均P0.05)。结论UUO所致RIF大鼠肾脏组织RARα、RARβ的mRNA极为蛋白表达均明显降低,梗阻时间越长表达越低,RIF的程度越严重。RARα/RARβ可能参与了RIF的发生进展。第二部分PPARy/RARs信号通路在单侧输尿管梗阻大鼠中与肾间质纤维化的联系及意义目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome propferator-activated receptor γ, PPARγ)/维甲酸受体(retinoic acid receptors, RARs)信号通路在单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)大鼠中与RIF的联系及意义。办法160只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组、PPARy受体激动剂组、PPARy受体阻断剂组和二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)组。所有大鼠行麻醉后背侧切口行左侧输尿管双重结扎术,手术3天后,三组大鼠每天均给予腹腔注射药物:PPARy受体激动剂组用罗格列酮钠(0.3mg/kg.d)、PPARy受体阻断剂组用GW9662(0.3mg/kg.d)、DMSO组用DMSO (0.6ml/kg.d),观察直到处死当天。分别于造模后第2周末和第4周末各组处死20只大鼠,留取左侧肾脏,HE和Masson染色行肾脏病理学检查,并计算RIF指数。运用免疫组

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