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阐述菌株耐镉酵母的筛选鉴定及其富镉机制的初步毕业论文范例
.1 材料35-363.1.1 实验菌株353.1.2 培养基353.1.3 主要试剂35-363.1.4 仪器设备363.2 策略36-373.2.1 镉元素的测定363.2.2 菌株对金属元素镉的耐性比较36-373.2.3 菌株培养中镉吸附率的计算策略373.3 结果与讨论37-433.3.1 不同镉浓度对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响37-383.3.2 培养时间对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响383
摘要:Cd被广泛运用于化工、电子和核工业等领域,每年有相当数量的Cd通过废气、废水、废渣等排入环境,造成污染。Cd不是生物生长发育历程的必需元素,也是自然界中对生物体危害性最大的重金属之一,连同Hg、As、Cr、Pb被称为污染环境的“五毒元素”。Cd一旦通过某种方式进入人体,就会在人体内蓄积起来,引起各种生理疾病,如前列腺癌、肾癌和痛痛病等。近年来,“镉米”等Cd污染事件的频频报道,更是给人们的生产、生活带来了很多的负面影响,由此,镉污染的治理迫在眉睫。传统的物理、化学镉污染治理策略由于成本高、易造成二次污染等受到局限;微生物治理策略因操作简单、修复效率高、适用范围广等优点受到亲睐。而酵母就是微生物修复的良好材料之一。本课题先对实验室保存的16株酵母菌株进行了耐镉性比较实验,以中筛选出了两株高耐镉性酵母菌株Y7和Y8。经菌落培养特点、细胞形态特点及生理生化特性鉴定,结合26S rDNA D1/D2区序列比对浅析,鉴定酵母菌株Y7为马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),Y8为胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)。镉吸附特性探讨表明,Y7和Y8对镉具有良好的耐受性和吸附性,在Cd浓度50mg/L的条件下,两株酵母菌株的生长OD600值都在5.0以上,24h后都能吸附溶液中70%以上的镉,且二者去除镉的最佳条件为pH6.0、温度30℃、接种量5%、装液量250mL三角瓶30mL、渗透压NaCl质量比3%。耐镉酵母富集镉的部位探讨表明,菌株Y7富集的镉主要集中在细胞壁上,而菌株Y8富集的镉则主要集中在细胞膜上和细胞质中。能量抑制剂DNP和DCC对菌株Y7的镉吸附影响不大,而对菌株Y8的镉吸附影响很大,说明菌株Y7对镉的吸附主要为不依赖能量代谢的生物吸附作用,而菌株Y8对镉的吸附则主要为依赖能量代谢的生物积累作用。SDS-PAGE和RT-PCR实验结果表明,50mg/L镉离子,对酵母菌株Y7和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) Y14蛋白质和基因表达的影响很大,而对菌株Y8的蛋白质表达影响不大。锌离子的加入,会减少菌株Y7、Y14对镉的吸附量,同时会减轻镉的毒害作用,降低其致死率和突变率,也可部分恢复其蛋白质和基因的正常表达;但会增加菌株Y8对镉的吸附量,同时会加剧镉的毒害作用,提升其致死率和突变率。 关键词:镉论文 耐镉酵母论文 生物吸附论文 生物积累论文 富镉机制论文
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    摘要6-7

    Abstract7-12

    第一章 绪论12-22

    1.1 镉的概述12-15

    1.1.1 镉元素的发现12

    1.1.2 镉的理化性质12-13

    1.1.3 镉在自然界中的分布13

    1.1.4 镉的用途13

    1.1.5 镉的污染与危害13-15

    1.2 镉污染的治理15-17

    1.2.1 传统镉污染的治理策略15-16

    1.2.2 镉污染的微生物治理策略16-17

    1.3 微生物对镉的耐性和抗性17-20

    1.3.1 镉对微生物细胞的毒性效应17-18

    1.3.2 耐性和抗性18-19

    1.3.3 酵母对有毒金属的耐性和抗性19-20

    1.4 课题探讨的目的与作用20-21

    1.5 实验内容与技术路线(见图1-4)21-22

    第二章 耐镉酵母菌株的筛选与鉴定22-35

    2.1 材料22-24

    2.1.1 实验菌株22

    2.1.2 培养基22-23

    2.1.3 主要试剂23

    2.1.4 仪器设备23-24

    2.2 策略24-27

    2.2.1 酵母菌株的活化24

    2.2.2 耐镉酵母菌株的筛选24

    2.2.3 耐镉酵母菌株的菌种鉴定24-27

    2.3 结果与讨论27-33

    2.3.1 耐镉酵母菌株的筛选27-28

    2.3.2 耐镉酵母菌株的菌种鉴定28-33

    2.4 本章小结33-35

    第三章 耐镉酵母菌株的镉吸附特性35-44

    3.1 材料35-36

    3.1.1 实验菌株35

    3.1.2 培养基35

    3.1.3 主要试剂35-36

    3.1.4 仪器设备36

    3.2 策略36-37

    3.2.1 镉元素的测定36

    3.2.2 菌株对金属元素镉的耐性比较36-37

    3.2.3 菌株培养中镉吸附率的计算策略37

    3.3 结果与讨论37-43

    3.3.1 不同镉浓度对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响37-38

    3.3.2 培养时间对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响38

    3.3.3 培养基pH对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响38-39

    3.3.4 培养温度对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响39-40

    3.3.5 接种量对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响40-41

    3.3.6 装液量对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响41-42

    3.3.7 NaCl渗透压对菌株Y7和Y8生长和镉吸附的影响42-43

    3.4 本章小结43-44

    第四章 耐镉酵母菌株富集镉的部位及机理初步探讨44-51

    4.1 材料44-45

    4.1.1 实验菌株44

    4.1.2 培养基44-45

    4.1.3 主要试剂45

    4.1.4 仪器设备45

    4.2 策略45-47

    4.2.1 镉元素的测定45-46

    4.2.2 酵母镉吸附部位的浅析46-47

    4.2.3 能量抑制剂DNP和DCC对菌株镉吸附的影响47

    4.3 结果与讨论47-50

    4.3.1 酵母Y7和Y8镉吸附部位的浅析47-48

    4.3.2 菌株Y7和Y8富集镉的机理浅析48-49

    4.3.3 其他共存金属离子对菌株镉吸附的影响49-50

    4.4 本章小结50-51

    第五章 锌离子对酵母抗镉的影响51-68

    5.1 材料51-53

    5.1.1 实验菌株51

    5.1.2 培养基51-52

    5.1.3 主要试剂52-53

    5.1.4 仪器设备53

    5.2 策略53-62

    5.2.1 镉、锌元素的测定53-54

    5.2.2 锌离子对菌株生长和镉吸附的影响54

    5.2.3 菌株致死率和突变率的测定54

    5.2.4 菌株蛋白质表达差别浅析54-57

    5.2.5 菌株基因表达差别浅析57-62

    5.3 结果与讨论62-67

    5.3.1 镉、锌离子对菌株Y7、Y8和Y14生长和吸附的影响62-63

    5.3.2 镉、锌离子对菌株Y7、Y8和Y14致死率和突变率的影响63-64

    5.3.3 镉、锌离子对菌株Y7、Y8和Y14蛋白质表达的影响64-65

    5.3.4 镉、锌离子对菌株Y14基因表达的影响65-67

    5.4 本章小结67-68

    结论68-70

    致谢70-71

    参考文献71-76

    攻读硕士学位期间发表的论文及科研情况76

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