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浅议拟南芥水稻OsSTSL1基因的克隆及功能学年论文格式
1个MYB顺式意义元件。Real-time PCR检测显示OsSTSL1基因受ABA, NaCl的诱导,且在三小时诱导表达最高,随后表达量逐渐降低;但在PEG处理条件下OsSTSL1基因表达量呈下降走势。对OsSTSL1启动子融合GUS报告基因进行组织化学染色分析,其结果显示OsSTSL1在叶、叶脉、下胚轴和根中表达,且对ABA诱导表达不显著。OsSTSL1融合GFP载体的亚
摘要:水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要的粮食作物,全世界约有40%的人口从大米为主食。水稻是我国种植面积最大、单产最高、总产最多的粮食作物,在我国粮食生产中占有举足轻重的地位,全国有60%从上的人口从大米为主食。但随着土地资源锐减、土地盐碱化、水资源减少和干旱等不利因素的日益凸显,对水稻产量造成严重威胁。植物应对逆境胁迫主要通过调节基因的表达,通过一系列信号转导途径而产生一系列生理生化反应,从减少逆境对其的伤害。对水稻抗逆基因的挖掘和抗逆机制的探讨,以而对水稻进行分子遗传改良,提升水稻对逆境胁迫的适应性是提升水稻产量的有效途径之一逆境胁迫如盐胁迫、干旱等和由这些胁迫引起的植物自身激素如脱落酸—ABA的转变都是影响水稻产量的重要因素,所从探讨水稻中的逆境胁迫响应基因和其抗逆机制是非常有必要的。本实验依据李霞老师课题组的STSl(Sensitive To Salt1),通过生物信息学和同源克隆的办法,找到一个对ABA、NaCl和PEG(模拟干旱)响应的基因,命名为OsSTSL1(Oryza sativa L. Sensitive To Salt Like1),对其进行克隆,并通过同源转化和异源转化探讨其功能。生物信息学分析发现OsSTSL1蛋白含有7个WD40结构域,属于WD40蛋白家族成员;启动子序列分析发现OsSTSL1启动子中含有1个DRE,2个ABRE,6个MYC和1个MYB顺式意义元件。Real-time PCR检测显示OsSTSL1基因受ABA, NaCl的诱导,且在三小时诱导表达最高,随后表达量逐渐降低;但在PEG处理条件下OsSTSL1基因表达量呈下降走势。对OsSTSL1启动子融合GUS报告基因进行组织化学染色分析,其结果显示OsSTSL1在叶、叶脉、下胚轴和根中表达,且对ABA诱导表达不显著。OsSTSL1融合GFP载体的亚细胞定位显示OsSTSL1蛋白在细胞核与细胞质中均有表达。OsSTSL1基因转化拟南芥过表达株系与Col-0相比,在转绿阶段可从耐受ABA和NaCl胁迫,但对干旱胁迫敏感;对根系的探讨发现,OsSTSL1基因转化拟南芥过表达株系在ABA和NaCl胁迫下主根生长与Col-0相比并无太大差异。BiFC实验结果表明,OsSTSL1蛋白与OsABl2蛋白之间具有相互意义,进一步证实OsSTSL1基因可能参与植物对逆境胁迫的响应。本文对水稻中OsSTSL1基因的探讨为揭示水稻响应ABA、NaCl和干旱胁迫的分子机制提供了新的科学依据,并为水稻遗传性状改良和分子育种提供论述依据及基因资源。 关键词:水稻论文 拟南芥论文 WD40蛋白论文 ABA论文 NaCl论文 干旱胁迫论文
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    摘要9-11

    ABSTRACT11-13

    缩略词表13-14

    第一章 引言14-30

    1 ABA探讨发展14-16

    1.1 ABA在生长和发育中的意义14-16

    1.1.1 ABA在植物正常生长条件下的意义14-15

    1.1.2 ABA在植物胁迫条件下的意义15-16

    2 ABA信号转导途径16-19

    2.1 ABA受体PYR/PYL/RCAR蛋白家族16-17

    2.2 PP2C磷酸酶蛋白家族17-18

    2.3 SnRK2激酶蛋白家族18-19

    2.4 ABA信号转导途径19

    3 NaCl为代表的盐害19-25

    3.1 盐胁迫的危害20-21

    3.1.1 生理干旱20

    3.1.2 离子胁迫20

    3.1.3 代谢失调20-21

    3.1.4 ROS伤害21

    3.1.5 光合意义下降21

    3.1.6 影响呼吸意义21

    3.2 植物的盐适应极为调控机制21-23

    3.2.1 渗透调节21-22

    3.2.2 离子区域化22-23

    3.2.3 活性氧代谢及抗氧化防御体系23

    3.3 SOS信号通路23-25

    3.3.1 SOS信号通路介绍24-25

    4 WD40蛋白探讨发展25-27

    4.1 WD40基本结构域25-26

    4.2 WD40参与植物生长及胁迫响应26-27

    5 水稻中ABA信号转导途径27-28

    6 水稻中SOS信号通路28-29

    7 WD40参与水稻对胁迫的响应29-30

    第二章 探讨目的与作用30-32

    第三章 实验材料与办法32-51

    1 实验材料32-33

    1.1 植物材料32

    1.2 材料种植32-33

    1.2.1 水稻种植32

    1.2.2 拟南芥种植32-33

    1.3 菌株33

    2 实验办法33-51

    2.1 生物信息学工具33

    2.2 基因表达检测33-35

    2.2.1 qRT-PCR检测OsSTSL1响应ABA及NaCl处理的表达方式33-35

    2.2.1.1 取材33

    2.2.

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