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探讨酊剂复色1号方水提取物的作用机制及其外用制剂的初步论文
组组间明显性检验用独立样本T检验;多组组间明显性检验用one-way Annova分析或协方差分析,多因素多水平明显性检验用析因分析资料的方差分析,组间多重对比采取bonferroni检验分析。当P0.05时,差别有统计学作用。结果:1.复色1号方水提取物在0.001~0.01g/1浓度范围内对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖与对照组相比无统计学作用(P0.05),
摘要:目的:1.研究复色1号方治疗白癜风的意义机制。2.进行复色1号方酊剂及凝胶剂的制备。3.考察复色1号方酊剂及凝胶剂的质量及经皮肤用药的安全性。4.初步探查复色1号酊剂及凝胶的临床疗效。办法:1.采取四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定0.001g/l、0.005g/l、0.0lg/l、0.05g/1及0.1g/l五种不同浓度的复色1号方水提取物培养的小鼠B16黑素瘤细胞吸光度值(A值),设单纯培养基作为对照组,从观察复色1号方水提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖的影响;根据MTT实验结果,选取药物浓度,采取多巴速率氧化法测定0.00lg/1、0.005g/l、0.01g/l三种不同浓度复色1号方水提取物在培养24小时、48小时及72小时后对细胞内酪氨酸酶活性的影响,设单纯培养基作为对照组,在酶标仪下测得各组A值。2.从75%酊剂作为溶剂浸泡复色1号方,制成酊剂;从复色1号方水提取物为药物,卡波姆940为主要基质,PEG-4000及甘油作为吸湿剂及增稠剂,三乙醇胺为卡波姆的中和剂,月桂氮卓酮作为透皮剂,凯松作为防腐剂,按凝胶剂的制法制成凝胶剂。采取肉眼观察及离心的办法评价酊剂的外观、澄清度,采取室温储存办法观察酊剂的稳定性;采取自身涂布、肉眼观察及显微镜下观察的办法评价凝胶剂的外观及细腻度;采取恒温培养箱、冰箱、离心及室温贮存的办法考察凝胶的稳定性;用pH计测定复色1号方酊剂及凝胶剂的pH值。3.选择FMMU豚鼠4只,Wistar大鼠40只。①皮肤刺激试验:豚鼠4只,背部剃毛后按拉丁方设计办法,将豚鼠背部皮肤分为四个区域,每区2.0×2.Ocm2大小,将酊剂组、凝胶组、酊剂对照(75%乙醇及0.16%月桂氮卓酮)和凝胶对照按设计办法涂在相应的皮肤上,酊剂从渗湿一层纱布为宜,凝胶涂0.1g/区为度,仔细、缓慢涂布,不得使药物流失。用一层保鲜膜覆盖保湿,再加纱布覆盖保护,最后用无刺激性胶布和绷带适当固定,从防止敷料脱落。每天受试药与对照物同时涂布1次,连续14天,每次涂抹后6小时,用温水洗去残留涂抹物。在每次去除涂抹物后1小时及再次涂抹前观察并记录涂抹部位红斑水肿状况及是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等状况,其发生及消退时间,并对红斑水肿进行评分,末次给药后去除受试物后1、24、48及72小时观察涂抹部位有无红斑和水肿等状况。②皮肤变态反应试验:大鼠40只,随机分为5组,每组8只,第1组为复色酊剂组,第2组为凝胶组,第3组为阳性对照组(2,4一二硝基氯代苯),第4组为酊剂空白对照组(酊剂基质),第5组为凝胶空白对照组(凝胶的赋形剂)。每只大鼠每次涂药量为0.1g(酊剂从渗透1层纱布为度),致敏给药于大鼠的左侧皮肤进行,激发给药于大鼠的右侧皮肤进行。致敏给药:将受试物涂在各组大鼠左侧脱毛区,持续6小时后用温水擦去受试物,第7天和第14天从同样办法重复一次。阳性对照组用1%2,4一二硝基氯代苯溶液。激发给药:于末次给受试物致敏后14天,将受试物及对照物涂布于大鼠背部右侧脱毛区。阳性对照组用0.1%2,4一二硝基氯代苯溶液。6小时后温水擦去受试物,即刻观察,并于24小时、48小时和72小时重复观察涂抹部位有无红斑和水肿等过敏反应,并按评分标准对红斑和水肿进行评分。4.观察临床上从复色1号酊剂及凝胶剂治疗的45例发展期白癜风患者的皮损,进一步考察此2种外用剂型经皮肤用药的刺激性及致敏性。节选2例典型病例说明此两种剂型联合内服药治疗白癜风的疗效和安全性,从肉眼观察皮损色素恢复作为疗效指标。5.统计办法:从SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计分析,计量资料从x±S表示,两组组间明显性检验用独立样本T检验;多组组间明显性检验用one-way Annova分析或协方差分析,多因素多水平明显性检验用析因分析资料的方差分析,组间多重对比采取bonferroni检验分析。当P0.05时,差别有统计学作用。结果:1.复色1号方水提取物在0.001~0.01g/1浓度范围内对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖与对照组相比无统计学作用(P0.05),0.05~0.1g/l对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖与对照组相比有明显作用(P0.001),呈现一定的抑制意义;在0.001g/1~0.1g/l浓度范围内,含药培养基组的A值(酪氨酸酶活性)与对照组对比均有明显性

测得各组A值。2.从75%酊剂作为溶剂浸泡复色1号方,制成酊剂;从复色1号方水提取物为药物,卡波姆940为主要基质,PEG-4000及甘油作为吸湿剂及增稠剂,三乙醇胺为卡波姆的中和剂,月桂氮卓酮作为透皮剂,凯松作为防腐剂,按凝胶剂的制法制成凝胶剂。采取肉眼观察及离心的办法评价酊剂的外观、澄清度,采取室温储存办法观察酊剂的稳定性

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