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谈水稻水稻分蘖抑制基因OsMAX2的亚细胞定位和表达毕业论文前言
162.3 独脚金内酯16-192.3.1 独脚金内酯的合成途径16-172.3.2 独脚金内酯的调控途径17-193 F-box蛋白在独脚金内酯信号转导途径中的意义19-223.1 MAX2编码F-box蛋白193.2 F-box蛋白的结构19-203.3 泛素介导的蛋白降解途径在植物激素调节中的意义203.4 F-box蛋白在植物中的调控意义203.5 F-box蛋白在植物激素信号传导中的意义
摘要:水稻是世界上食用人口最多、历史最悠久的农作物。全球25亿从上的人口主食大米。全球约有120多个国家和地区以事稻米生产。中国是世界上最大的产稻国,产量占世界稻米总产的1/3。水稻在我国粮食安全中起着举足轻重的意义。分蘖实质上就是水稻的分枝,是水稻的重要农艺性状之一,它通过直接影响水稻穗数的多少,进而影响水稻单位面积产量。由此,对水稻分蘖的探讨具有重要的论述作用和运用价值。随着水稻功能基因组探讨的展开、分子克隆技术的迅猛进展,近年来一批参与水稻分蘖形成和内源激素调控的相关基因被克隆,通过对这些基因功能的深入发掘使得水稻分蘖的论述探讨取得了重大突破。前期工作中,我们获得一份水稻极度分蘖突变体M1B-ext并对其进行了探讨,通过图位克隆和功能验证实验得到了一个调控水稻分蘖单隐性核基因ext-M1B。该基因位于第6染色,基因序列分析表明其与拟南芥中max2基因高度同源,据报道max2参与独角金内酯激素调控途径抑制植物分枝,故本探讨中将ext-M1B命名为OsMAX2。根据该基因氨基酸序列推测OsMAX2编码F-box蛋白并具有LRR重复结构域,可能作为E3泛素连接酶的一个亚基,在泛素降解途径中识别靶蛋白。为了进一步阐述该基因的功能,本实验通过业细胞定位、组织化学定位、各组织转录水平Real-time定量分析对OsMAX2基因的表达方式进行了初步探讨。OsMAX2基因的亚细胞定位分析,构建pHB-35S:OsMAX2:YFP融合表达载体通过农杆菌介导转化水稻,通过检测得到阳性植株;构建pA7-35S:OsMAX2:YFP瞬时表达载体使用农杆菌浸染洋葱表皮细胞,使用PEG介导法瞬时转化水稻原生质体:利用荧光显微镜和荧光共聚焦显微镜检测转化子中的荧光信号。在稳定表达的T。代阳性水稻植株中未检测到荧光信号,将在T1代纯合个体中做进一步检测。OsMAX2:YFP融合蛋白在洋葱表皮细胞和水稻原生质体中的表达结果表明,在洋葱表皮细胞和水稻原生质体中OsMAX2编码蛋白定位于细胞核上OsMAX2基因GUS组织化学定位,克隆OsMAX2基因编码区上游-2370bp的序列做为预测的启动子序列并构建于DX2181G-pOsMAX2:GUS表达载体中。通过农杆菌介导转化水稻愈伤组织,并获得了大量的转基因阳性植株。对阳性转基因植株To代取不同组织进行GUS染色,结果表明OsMAX2在根、茎、叶、幼叶、叶芽、叶鞘、幼穗、节间等组织中均有表达。OsMAX2基因在各组中的转录水平分析,对根、茎、叶、叶鞘、幼穗、幼苗OsMAX2基因mRNA水平的定量分析表明:OsMAX2在从上组织中均有表达,与GUS染色结果相吻合,其中在叶、叶鞘、茎中表达量较高。综上所述,对OsMAX2基因表达方式的分析表明,该基因表达蛋白定位于细胞核中,在水稻各个组织中均有表达。本试验结果为进一步深入挖掘OsMAX2基因在泛素化介导的独角金内酯信号传导调控水稻分蘖途径中的基因功能从及下一步的互作蛋白探讨打下基础。 关键词:独角金内酯论文 分蘖论文 OsMAX2论文 水稻论文
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    摘要4-6

    Abstract6-12

    第一部分:文献综述12-22

    1 水稻分蘖的探讨发展12-15

    1.1 水稻分蘖的概念12

    1.2 水稻分蘖发生的分子生物学探讨12-13

    1.3 水稻相关基因的克隆和功能探讨13-15

    2 常见的植物激素与植物分枝调控15-19

    2.1 生长素15-16

    2.2 细胞分裂素16

    2.3 独脚金内酯16-19

    2.3.1 独脚金内酯的合成途径16-17

    2.3.2 独脚金内酯的调控途径17-19

    3 F-box蛋白在独脚金内酯信号转导途径中的意义19-22

    3.1 MAX2编码F-box蛋白19

    3.2 F-box蛋白的结构19-20

    3.3 泛素介导的蛋白降解途径在植物激素调节中的意义20

    3.4 F-box蛋白在植物中的调控意义20

    3.5 F-box蛋白在植物激素信号传导中的意义20-21

    3.6 F-box蛋白参与水稻独脚金内酯分蘖调控途径模型21-22

    第二部分:实验材料与办法22-33

    1 材料22-24

    1.1 植物材料2

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